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加州理工学院建立首个全身透明小鼠
作者:佚名    出处:佚名    浏览次数:2920(2014/8/11)
 

    由于脂肪的存在,厚组织都是不透光的。要进行成像就得把组织切得特别薄,问题是这样就无法获得组织的3D结构。近年来出现了一些通过去除脂肪让组织变透明的方法,不过这些方法大多需要在组织透明化之前,构建和表达发荧光的目标蛋白。随后,斯坦福大学的Karl Deisseroth开发出CLARITY技术,该技术允许人们在组织透明化之后,使用标记抗体或核酸探针,大大拓展了组织透明化的应用。不过CLARITY处理组织仍有大小限制,Deisseroth说。

    在本研究中,文章的资深作者Viviana Gradinar将自己的全身组织透明化技术称为PARS(perfusion assisted agent release in situ)。该技术在CLARITY技术的基础上,将透明剂持续泵入动物的循环系统(或者通过脑脊液管道泵入大脑),让试剂逐渐进入组织。Gradinaru等人利用PARS建立了几乎完全透明的小鼠和小鼠器官,并用荧光抗体在其中揭示不同的细胞和结构。

    “这是一次重要的技术进步,”麻省大学的Guangping Gao教授评论道,他的研究方向是开发腺病毒相关载体用于基因治疗。“可以为我们揭示病毒如何穿过血管进入细胞,以及宿主如何与病毒载体相互作用。”

    Gradinaru指出,PARS特别适合用来观察机体中的长神经元。“这一方法可以帮助人们定位周围神经系统,”她说。

    PARS可以同时定位DNA、RNA和蛋白,“但仍然受到抗体扩散能力的限制,”Gradinaru说。因此在使用这一技术时,最好使用纳米抗体等较小的标记。另外,数据处理也是PARS面临的一大挑战。

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